鏈霉親和素(SA)修飾金納米顆粒150nm的技術
2025-08-13
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以下是關于鏈霉親和素（SA）修飾150nm金納米顆粒的詳細說明，涵蓋制備、特性及應用：
1. 基本特性
金納米顆粒（AuNPs）核心：
尺寸：150nm（可通過動態光散射DLS或透射電鏡TEM驗證）。
表面等離子共振（SPR）：在可見光區（約520-600nm）有強吸收，可用于比色檢測。
穩定性：需表面修飾（如SA）防止聚集，SA提供負電荷增強膠體穩定性。
鏈霉親和素（SA）修飾：
結合位點：每個SA可結合4個生物素分子，實現高密度生物分子偶聯。
偶聯方式：通常通過靜電吸附或共價連接（如羧基-氨基交聯）將SA固定在AuNPs表面。
2. 制備方法
步驟示例：
AuNPs合成：
檸檬酸鈉還原法（適用于小尺寸）：需調整方法（如種子生長法）制備150nm AuNPs。
表征：UV-Vis光譜（SPR峰紅移）、TEM（確認單分散性）。
SA修飾：
活化AuNPs：用帶羧基的 linker（如11-巰基十一烷酸，MUA）修飾AuNPs，EDC/NHS活化羧基。
SA偶聯：將SA與活化后的AuNPs孵育（pH 7.4 PBS緩沖液，室溫2小時）。
封閉：加入BSA或乙醇胺封閉未結合位點。
純化：
離心（如10,000rpm, 15分鐘）去除游離SA，重懸于緩沖液（如含0.1% BSA的PBS）。
3. 關鍵質量控制
結合效率：
BCA法：測定上清液中未結合的SA濃度。
SDS-PAGE：驗證SA是否成功偶聯。
功能性測試：
加入生物素化熒光分子（如FITC-生物素），通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測信號。
4. 應用方向
免疫檢測：
側向層析：作為信號放大標簽，檢測生物素化抗體（如新冠病毒抗原檢測）。
ELISA替代：SA-AuNPs增強比色信號，提升靈敏度。
分子診斷：
DNA檢測：結合生物素化探針，用于核酸雜交（如SARS-CoV-2 RNA檢測）。
細胞標記：
靶向標記細胞表面生物素化受體。
藥物遞送：
裝載生物素化藥物，實現靶向釋放（需優化尺寸以穿透血管屏障）。
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